导读

人类基因组中超过98%的区域都是非编码区域。长非编码RNA 是一类广泛转录但不翻译产生功能性蛋白质的核糖核酸大分子，在不同的物种中广泛存在并发挥重要作用 (Nat Cell Biol, 2019)。

陈玲玲研究组长期从事长非编码RNA加工、代谢与功能研究。早在2016年陈玲玲提出长非编码RNA的功能与其在细胞内的定位息息相关(Trends Biochem Sci, 2016)，近年来通过解析不同类型长非编码RNA分子家族的加工、代谢、定位与功能的偶联，陈玲玲研究组发现了一系列非编码RNA的新功能 (http://www.chenlab-ncrna.com/publications)，对深入认识长非编码RNA的生物学功能具有重要推动作用(Cold Spring Harb Symp Quant Biol, 2020)。

与信使RNA在物种进化过程中的序列和功能都高度保守不同，长非编码RNA在不同物种之间缺乏严格的序列保守性，但在序列，RNA结构，基因组的位置和功能等多个层次上体现保守性。其中，不同物种之间序列和基因组位置保守的长非编码RNA的加工是否保守、以及相应的生物学功能是否存在差异却鲜有研究。

中国科学院分子细胞科学卓越创新中心（生物化学与细胞生物学研究所）陈玲玲研究组在国际著名学术期刊Cell上发表了关于长非编码RNA的最新研究成果：“ Distinct processing of lncRNAs contributes to non-conserved functions in stem cells ”。该研究首次发现长非编码RNA在不同物种来源干细胞中的特异性加工是其在进化中发生适应性功能变化的重要调控新机制，为深入理解长非编码RNA的进化及功能提供了新思路。

 

通过分离人、鼠胚胎干细胞细胞核和细胞质来源的RNA，并结合高通量测序技术，这项最新研究首次发现人、鼠胚胎干细胞中长非编码RNA的加工及亚细胞定位存在显著差异。序列及基因组位置保守的长非编码RNA在人胚胎干细胞中更多定位在细胞质内，而在鼠胚胎干细胞中则更多的滞留在细胞核内。值得一提的是，多个定位在人胚胎干细胞细胞质中的长非编码RNA参与维持人干细胞自我更新，而相应的基因组位置保守的长非编码RNA则更趋向于定位在鼠胚胎干细胞细胞核内，对鼠胚胎干细胞的维持没有明显作用。这些长非编码RNA在不同物种的干细胞内的特异加工及亚细胞定位的不同，提示它们在人、鼠的胚胎干细胞中可能具有不同的功能。

Conserved lncRNAs Have Distinct Subcellular Localization Patterns in hESCs and mESCs

研究详细解析了其中一个新型的长非编码RNA—— FAST在维持人胚胎干细胞自我更新的分子机制。FAST是基因组位置保守的长非编码RNA，在胚胎干细胞中特异高表达。在人、猴来源的胚胎干细胞hFAST定位在细胞质内，维持胚胎干细胞的自我更新。机制研究表明，在人胚胎干细胞中，细胞质定位的hFAST结合β-TrCP蛋白，使β-TrCP不能降解重要信号通路WNT中关键蛋白β-catenin，从而维持WNT信号通路持续激活和干细胞的自我更新。在鼠源胚胎干细胞中，mFast定位在细胞核内，不能结合β-TrCP，也不参与到WNT信号通路。

hFAST Protects b-Catenin from Ubiquitination to Keep WNT Activation in hESCs

为了进一步探究长非编码RNA在不同物种之间的加工定位差异的分子机制，研究人员结合生物信息学分析预测和实验验证筛选到了调控长非编码RNA种属特异定位的关键因子PPIE。在人、鼠胚胎干细胞中PPIE对于长非编码RNA的加工存在明显不同。在鼠胚胎干细胞中，PPIE蛋白高表达并抑制长非编码RNA (包括hFAST) 的剪接加工而使其滞留在细胞核内；在人胚胎干细胞中，PPIE蛋白低表达，使得更多的长非编码RNA被剪接加工并得以运输到细胞质内发挥不同功能；而在猴胚胎干细胞中PPIE蛋白在细胞中的表达、FAST和其它长非编码RNA在细胞内的定位和功能则更趋向于人胚胎干细胞。

Differential Expression of PPIE Affects RNA Processing during Evolution from Mouse to Monkey and Human

该工作首次发现RNA加工和定位在长非编码RNA发挥功能过程中具有重要作用和种属特异性，从而提示长非编码RNA的姿态万千可能是物种特异性的调控和适应的一个重要机理，丰富了我们对长非编码RNA表达调控、定位和功能多样性的认识。

A Model of Distinct RNA Processing in Modulating the Non-conserved FAST Function in Pluripotency

中国科学院分子细胞卓越创新中心(生物化学与细胞生物学研究所)陈玲玲研究组博士研究生郭纯洁和中国科学院-德国马普计算生物学伙伴研究所杨力研究组博士研究生马旭凯为该论文的共同第一作者，陈玲玲研究员为该论文通讯作者。杨力研究员、美国康涅狄格大学Gordon Carmichael教授、北京大学汪阳明教授及其团队成员参与了该项研究。该项工作也得到分子细胞中心李劲松研究员、景乃禾研究员，分子生物学技术平台和细胞分析技术平台的大力支持，并得到来自中科院、科技部、基金委和HHMI国际青年研究员的经费支持。